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                高效液相色譜(HPLC)的基本原理和系統組成

                更新時(shí)間:2023-09-12瀏覽:2223次

                高效液相色譜(HPLC)是色譜法的一個(gè)重要分支,其應用范圍廣泛,對樣品的適用性廣,且不受分析對象的揮發(fā)性和熱穩定性的限制。 幾乎所有的化合物,包括高沸點(diǎn)、極性、離子化合物和大分子物質(zhì)都可以用高效液相色譜法進(jìn)行分析測定,從而彌補了氣相色譜法的缺點(diǎn)。 目前已知的有機化合物中,約20%可以通過(guò)氣相色譜法進(jìn)行分析,而80%需要通過(guò)高效液相色譜法進(jìn)行分析。 高效液相色譜法具有分離效率高、分析速度快、檢測靈敏度好等特點(diǎn),可以分析分離高沸點(diǎn)且不能汽化的熱不穩定生理活性物質(zhì)。 分離與分析技術(shù)在該領(lǐng)域的重要應用。

                基本原理

                色譜法的分離原理是:溶于流動(dòng)相中的各組分經(jīng)過(guò)固定相時(shí),由于與固定相(stationphase)發(fā)生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強弱不同,在固定相中滯留時(shí)間不同,從而先后從固定相中流出。又稱(chēng)為色層法、層析法。

                高效液相色譜法以經(jīng)典的液相色譜為基礎,以液體為流動(dòng)相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有顆粒極細的高效固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測,從而實(shí)現對試樣的分析。

                HPLC

                系統組成

                HPLC 系統一般由輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、數據記錄及處理裝置等組成。其中輸液泵、色譜柱、檢測器是關(guān)鍵部件。此外,還可根據需要配置梯度洗脫裝置、在線(xiàn)脫氣機、自動(dòng)進(jìn)樣器、預柱或保護柱、柱溫控制器等,現代HPLC 儀還有微機控制系統,進(jìn)行自動(dòng)化儀器控制和數據處理。制備型HPLC 儀還備有自動(dòng)餾分收集裝置。

                高效液相色譜




                 

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